对于疑似病毒感染的疾病(如SARS),除根据患者的临床症状判断外,还需藉助检体的实验室检测加以辅助诊断。

病毒感染的诊断过程主要包括检体的采集、分离病毒、抗原侦测及血清学检测。

检体一般来自病毒的自然感染部位,如呼吸道病毒的检体可采集咽喉拭子或鼻分泌物;引起腹泻的病毒可采集粪便;抗体检测则需要采集病人血清。未知病毒检体的来源会更加广泛。

1、病毒的分离成功与否很大程度上取决于检体的采集时间,疾病最初数天内采集分离效果最佳。

由于病毒必须在活细胞内生存,故检体经除菌后可接种于敏感细胞。病毒在细胞内增值,复制出大量的子代,并在这一过程中产生细胞病变、细胞融合、血球凝集等生物学效应。根据这些特征性的变化可判断检体中病毒的存在。

2、用针对某一种病毒表面抗原的抗体,侦测检体中该病毒抗原的存在,即可进一步推知这种病毒的存在,是临床快速检验常使用的方法。

* ELISA法:将某种病毒表面抗原的特异性抗体吸附在微量检测塑胶板上,加入的病人检体中如有与抗体相对应的病毒/抗原存在就可以被捕捉到。通过另一标记有酵素之病毒抗体的加入使阳性反应得以呈现,表明检体中有待检病毒抗原的存在。

* PCR:将分子生物学技术应用于临床检验已经不再是遥不可及的事情。合成一段病毒DNA做引子,利用PDR的方法进行扩增,可以侦测出检体中有无相关的病毒核酸(即病毒)的存在。

* 核酸杂交:将检体点在纤维膜上加以处理。若其中还含有与已知病毒核酸相同的病原存在,则可与加入之标记了的探测用病毒核酸杂交,并通过标记物的反应显示出来。

3、血清学检测 病毒感染可引发人体产生对抗病毒蛋白的特异性抗体,因此检测患者的血清抗体价也具有辅助诊断的意义。

检测结果以病人恢复期血清价与急性期血清价相比较有4倍以上增高才有意义。

血清学检测方法有多种。基本过程是将纯的病毒制品或病毒蛋白固定在一种支持载体上,与待捡血清混合后,血清中存在的抗体就会与病毒抗原结合,加入标记有酵素或萤光素的二次抗体,使阳性反应得以呈现。例如日前台大医学院高全良教授研发的SARS病毒诊断试剂,就是通过呈现萤光反应来进行血清抗体检测的。

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