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特殊聚合脢在迟滞股上合成短引子
 复制开始时需要一条特殊引子(primer),一旦复制开叉形成,DNA聚合脢会持续出现在碱基配对链末端来合成新股;但DNA聚合脢于迟滞股上合成每个短股DNA片段仅需四秒钟,之后必须沿着模板股远处开始合成另一条全新片段。

 为产生此碱基配对引子股,我们需要一项特殊机制,此机制中含有一DNA primase的酵素,它可以利用核糖核酸三磷酸来合成短RNA引子,于真核细胞中,这些引子约有十个核甘酸长且通常于迟滞股上形成,它们利用DNA聚合脢开始每一条Okazaki片段之延长作用,每当合成遇到前一个片段近5端的RNA引子时,合成作用即便停止;为了使迟滞股上的许多DNA片段形成连续性的DNA链,一项DNA修补机制能快速除去旧的RNA引子,并以DNA取代它,随即DNA连结脢(DNA ligase)便将新合成DNA片段之3端与前一段片段之5端连结起来。

特殊酵素协助打开DNA双股之复制分叉前端
 DNA双股螺旋必须打开复制分叉前端,去氧核糖核酸三磷酸(dNTP)才能与模板形成碱基配对,然而,DNA双股螺旋在正常状况下是很稳定的,因此,稳固之碱基配对必须于至少摄氏90度下才能被分开,因此,大部分的DNA聚合脢只有在模板股已与互补股分开的状态下才能作用;另有其他蛋白可协助打开双股螺旋,以利DNA模板暴露出来好让DNA聚合脢进行复制作用。

 DNA复制过程所需的两种酵素为:(1)DNA helicase-此酵素在结合至单股DNA时可水解ATP,ATP之水解可改变蛋白分子的外型因而具有机械性功能,DNA helicase便利用此特性在DNA单股上快速地移动,而当其遇到双股分叉处时可继续向前进,因而可将双股螺旋打开。(2)去双股螺旋稳定性蛋白(helix-destabilizing protein)-又称为单股DNA结合(SSB)蛋白,这些蛋白无法直接打开DNA双股螺旋,但它们有助于稳定单股DNA之构造,例如:它们可协助DNA helicase将双股暴露出来。